第三節 革蘭陽性桿菌[第3頁/共8頁]

(2)活菌計數：將彙集的標本用無菌心機鹽水稀釋成lO^-1~10^-3。1塗布法：取各稀釋液O.lml彆離接種於卵黃瓊脂平板上，用L形玻棒塗布均勻，置35℃孵育12h，本菌在該平板上產生蠟樣光芒，易於辨認。2傾瀉平板法：取各稀釋液O.lml注入空的無菌平皿，將熔化冷至45℃～50℃的營養瓊蠟適當傾入並當即混勻，冷凝後置35℃培養24~48h，每個稀釋度平行作兩個平皿。計數時挑選菌落數在30~300個之間的平板計數。普通以為蠟樣芽孢桿菌>10^5個／g或>10^5個／ml時，即有產生食品中毒的能夠。

1．分離培養：將血液標本(3~5ml)或腦脊液的離心沉澱物接種兩支腦心浸液（標本量的IO倍）培養基中。此中一支置10%C02環境中，37℃培養24~48h，各作一次血平板分離：另一支置4℃培養，每24h作一次血平板分離：持續4天，今後每週一次至四周。咽喉拭子、構造及糞便接種於肉湯培養基中，置4℃培養，停止冷增菌，轉種和培養體例同上。從血平板上挑取有β溶血環的菌落，做塗片染色鏡檢並進一步鑒定。

2．分離培養：初度分離要在厭氧環境下，傳代後可在有氧環境中發展，在含有葡萄糖或血液的培養基中發展較好。

(2)核酸檢測：用PCR法快速診斷結核分枝桿菌傳染。該法特同性和敏感性均大於95%。

(4)鑒定：按照形狀、染色、生化反應等作出開端鑒定，以後可作血清學和噬菌體分型。

(3)抗PPDlgG的檢測：用ELISA法檢測患者血清中抗PPDlgG抗體可作為活動性結核分枝桿菌傳染的快速診斷體例之一。肺結核病人的血清陽性率為80%~90%。

2．分離培養：固體培養基培養法和液體培養基培養法。

(3)植物實驗：將標本或培養物製成懸液，皮下接種於豚鼠(1ml)或小白鼠(0.2ml)。都可引發敗血癥。並於1～3d後滅亡。內臟和血液中存在大量有莢膜的細菌。

1．**加特納菌革蘭染色從陽性到弱陽性，普通說來，嘗試室儲存菌株趨勢革蘭陽性，新奇臨床標本平分離的菌株趨勢革蘭陽性，在高濃度血清中發展的菌株呈革蘭陽性。